支原体Mycoplasma.ppt

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1、 支原体又叫霉形体，属柔支原体又叫霉形体，属柔膜体纲，是一类无细胞壁膜体纲，是一类无细胞壁的细菌，具有多形性，能的细菌，具有多形性，能通过细菌滤器。是目前已通过细菌滤器。是目前已知能在无生命的培养基中知能在无生命的培养基中繁殖的最小原核细胞型微繁殖的最小原核细胞型微生物。生物。第第17章章 支原体支原体 （Mycoplasma）特点特点:(1)(1)无细胞壁，细胞柔软，多形性，能通过细菌滤器无细胞壁，细胞柔软，多形性，能通过细菌滤器 （多形性、可塑性、滤过性）（多形性、可塑性、滤过性）(2)(2)在人工培养基中生长繁殖，形成在人工培养基中生长繁殖，形成“煎荷包蛋状煎荷包蛋状”菌菌落落(3)(3

2、)基因组小，含有基因组小，含有DNADNA和和RNA RNA(4)(4)以二分裂或芽生方式繁殖以二分裂或芽生方式繁殖 (5)(5)对青霉素有抵抗力对青霉素有抵抗力 常污染实验室培养的细胞及生物制品常污染实验室培养的细胞及生物制品一、形态与染色形态与染色 n 外围只有胞浆膜，常呈球状、两极状、环状、杆外围只有胞浆膜，常呈球状、两极状、环状、杆状偶见分枝丝状，无鞭毛，革兰氏染色呈阴性，着状偶见分枝丝状，无鞭毛，革兰氏染色呈阴性，着色不良，姬姆萨或瑞氏染色良好，呈淡紫色。色不良，姬姆萨或瑞氏染色良好，呈淡紫色。n 支原体的细胞膜具有三层结构，内、外层主要是支原体的细胞膜具有三层结构，内、外层主要是蛋

3、白质，中间层主要是脂质蛋白质，中间层主要是脂质 (固醇含量高）。固醇含量高）。二、培养特性二、培养特性 l由于基因组小，合成能力较弱，营养要求较高，需添加外源脂肪由于基因组小，合成能力较弱，营养要求较高，需添加外源脂肪酸、甾醇、辅酶酸、甾醇、辅酶I I、氨基酸等。、氨基酸等。l生长缓慢（生长缓慢（2-6d2-6d长出微小菌落），长出微小菌落），菌落呈菌落呈“荷包蛋状荷包蛋状”（猪肺炎（猪肺炎支原体除外）支原体除外），菌落中心深入培养基中，致密、色暗；周围长在，菌落中心深入培养基中，致密、色暗；周围长在培养基表面，较透明。培养基表面，较透明。l无细胞壁无细胞壁l二分裂方式繁殖二分裂方式繁殖l典型

4、菌落呈油煎蛋样典型菌落呈油煎蛋样n 可在鸡胚的卵黄囊或绒毛尿囊膜上生长，有可在鸡胚的卵黄囊或绒毛尿囊膜上生长，有些菌株可致鸡胚死亡。也能在细胞培养中生长，些菌株可致鸡胚死亡。也能在细胞培养中生长，不一定引起细胞病变，但可妨碍病毒的细胞培不一定引起细胞病变，但可妨碍病毒的细胞培养。养。n 液体培养基中，生长数量少，不易见浑浊，仅有液体培养基中，生长数量少，不易见浑浊，仅有 小颗粒沉于管底。小颗粒沉于管底。支原体支原体 L L型型遗传上与细菌无关遗传上与细菌无关 与原菌有关，常可以回复与原菌有关，常可以回复需甾醇需甾醇 一般不需甾醇一般不需甾醇在一般培养基中稳定在一般培养基中稳定 大多需要高渗培养

5、大多需要高渗培养生长慢，菌落小生长慢，菌落小 菌落稍大菌落稍大 0.1-0.3mm 0.5-1.0mm0.1-0.3mm 0.5-1.0mm菌落中心深埋于培养基中菌落中心深埋于培养基中 菌落生长于基质表面，菌落生长于基质表面，不易刮除，光亮、透明不易刮除，光亮、透明 易于刮除，较暗、不透明易于刮除，较暗、不透明液体培养混浊度低液体培养混浊度低 有一定混浊度有一定混浊度对洋地黄皂苷敏感对洋地黄皂苷敏感 不敏感不敏感根据对糖类分解利用能力不同，分为两根据对糖类分解利用能力不同，分为两群：群：一群能分解葡萄糖及其他多种糖类产酸一群能分解葡萄糖及其他多种糖类产酸不产气，称不产气，称发酵型发酵型。另一群

6、不分解糖，称另一群不分解糖，称非发酵型非发酵型，但能利，但能利用精氨酸作为碳源和能量来源。用精氨酸作为碳源和能量来源。常用的生理生化实验：常用的生理生化实验：l葡萄糖发酵和精氨酸水解试验葡萄糖发酵和精氨酸水解试验l尿素水解试验尿素水解试验(区分脲原体与其它支原体区分脲原体与其它支原体)l洋地黄苷敏感性试验洋地黄苷敏感性试验支原体的抗原由细胞膜上的蛋白质和类支原体的抗原由细胞膜上的蛋白质和类脂组成。可用相应抗血清做生长抑制试脂组成。可用相应抗血清做生长抑制试验、代谢抑制试验、免疫荧光试验及验、代谢抑制试验、免疫荧光试验及ELISA等进行鉴定和分型。等进行鉴定和分型。抵抗力较一般细菌弱，对理化因素

7、敏感抵抗力较一般细菌弱，对理化因素敏感 病原性支原体常常定居于多种动物病原性支原体常常定居于多种动物呼吸道呼吸道、泌尿生殖泌尿生殖道、消化道粘膜表面及乳腺、眼等道、消化道粘膜表面及乳腺、眼等，引起牛传染性胸，引起牛传染性胸膜肺炎、猪喘气病、禽败血霉形体感染等，传播途径膜肺炎、猪喘气病、禽败血霉形体感染等，传播途径主要是呼吸道。主要是呼吸道。单独感染时，常常症状轻微或无临床表现，当细菌或单独感染时，常常症状轻微或无临床表现，当细菌或病毒等继发感染或受外界不利因素作用引起疾病。特病毒等继发感染或受外界不利因素作用引起疾病。特点是潜伏期长，慢性及地方性流行。点是潜伏期长，慢性及地方性流行。主要毒力因

8、子：主要毒力因子：胞黏素胞黏素，与黏膜呼吸道上皮细胞的纤，与黏膜呼吸道上皮细胞的纤毛有关，粘附导致纤毛损害并脱落从而使肺易发继发毛有关，粘附导致纤毛损害并脱落从而使肺易发继发感染。感染。七、诊断七、诊断l直接镜检：直接镜检：形态多样，意义不大。形态多样，意义不大。l分离培养：分离培养：过滤除菌病料，进行细菌过滤除菌病料，进行细菌L L型鉴定及型鉴定及2-32-3次次克隆、纯化（克隆、纯化（0.450.45mm过滤）。过滤）。l生理生化反应生理生化反应：洋地黄苷、尿酶及葡萄糖、精氨酸洋地黄苷、尿酶及葡萄糖、精氨酸分解试验。缩小选用抗血清的范围，种的鉴定必须用血分解试验。缩小选用抗血清的范围，种的

9、鉴定必须用血清学方法最后确定，这与细菌鉴定到种只需作生理生化清学方法最后确定，这与细菌鉴定到种只需作生理生化测定不同。测定不同。l血清学检查血清学检查：生长抑制试验、代谢抑制试验等生长抑制试验、代谢抑制试验等第第2节节 猪肺炎支原体猪肺炎支原体猪地方流行性肺炎（猪地方流行性肺炎（猪喘气病猪喘气病）的病原。形态多样，）的病原。形态多样，大小不等，以环形为主。兼性厌氧，营养要求高，大小不等，以环形为主。兼性厌氧，营养要求高，菌落不呈菌落不呈“荷包蛋状荷包蛋状”以哺乳仔猪和幼猪最为易感，表现为以哺乳仔猪和幼猪最为易感，表现为咳嗽和气喘咳嗽和气喘，发病率高，死亡率低。存在于病猪肺的细支气管和发病率高，

10、死亡率低。存在于病猪肺的细支气管和支气管上皮细胞表面和纤毛，经呼吸道传播，通常支气管上皮细胞表面和纤毛，经呼吸道传播，通常由病猪传给低日龄易感猪，也可经风力传播数公里由病猪传给低日龄易感猪，也可经风力传播数公里之遥。之遥。鸡毒支原体鸡毒支原体主要感染鸡和火鸡，引起慢性呼吸道病主要感染鸡和火鸡，引起慢性呼吸道病（Chronic Respiratory Disease，CRD）。）。病原体存在于病鸡和带菌鸡的病原体存在于病鸡和带菌鸡的呼吸道、卵巢、呼吸道、卵巢、输卵管和精液输卵管和精液中，可通过垂直传递或交配将病中，可通过垂直传递或交配将病传遍整个鸡群，鸡群一旦染病难以彻底根除。传遍整个鸡群，鸡群

11、一旦染病难以彻底根除。在其它病原微生物继发感染时加重病情。在其它病原微生物继发感染时加重病情。嗜血支原体嗜血支原体寄生于红细胞寄生于红细胞表面表面，大多球状。，大多球状。对青霉素及同类药物有抗性，体外不能培养。对青霉素及同类药物有抗性，体外不能培养。感染多感染多无临床症状无临床症状，在隐性感染的动物体内可，在隐性感染的动物体内可存在数年之久。存在数年之久。嗜血支原体具有黏附素，菌体的黏附致使红细嗜血支原体具有黏附素，菌体的黏附致使红细胞凹陷进而胞凹陷进而破坏细胞骨架破坏细胞骨架，增加其脆性。嗜血，增加其脆性。嗜血支原体感染的主要特点是支原体感染的主要特点是引致贫血引致贫血，本质是自，本质是自身

12、免疫病。身免疫病。立克次体（立克次体（RickettsiaRickettsia）立克次体是一类介于病毒与细菌之间的原核细胞型微立克次体是一类介于病毒与细菌之间的原核细胞型微生物，专性细胞内寄生。在形态结构和繁殖方式等特生物，专性细胞内寄生。在形态结构和繁殖方式等特性上与细菌相似，而在生长要求上又酷似病毒。此类性上与细菌相似，而在生长要求上又酷似病毒。此类微生物引起人和动物立克次体病（如微生物引起人和动物立克次体病（如Q Q热、斑疹伤寒、热、斑疹伤寒、恙虫病等）。可经气溶胶传染，是潜在的生物武器。恙虫病等）。可经气溶胶传染，是潜在的生物武器。为纪念为纪念Howard Taylor Rickett

13、sHoward Taylor Ricketts而命名。而命名。一、生物学特性生物学特性 1.1.多形性，主要是多形性，主要是球杆状球杆状。2.2.大小介于细菌和病毒之间，多数大小介于细菌和病毒之间，多数不能不能通过细菌通过细菌滤器。滤器。3.3.革兰氏阴性，革兰氏阴性，有细胞壁有细胞壁 4.4.专性专性细胞内寄生细胞内寄生 5.5.以二分裂方式繁殖以二分裂方式繁殖6.6.酶系统不完整，依赖宿主酶系统不完整，依赖宿主 细胞提供细胞提供ATPATP、辅酶、辅酶I I和和 辅酶辅酶A A等才能生长等才能生长7.对理化因素抵抗力不强，尤对热敏感，对某些广对理化因素抵抗力不强，尤对热敏感，对某些广谱抗生

14、素敏感，但对磺胺药不敏感，反而能促进谱抗生素敏感，但对磺胺药不敏感，反而能促进其生长。其生长。8.致人畜疾病的立克次体多寄生于网状内皮系统、致人畜疾病的立克次体多寄生于网状内皮系统、血管内皮细胞或红细胞，寄生于虱、蚤、蜱、螨血管内皮细胞或红细胞，寄生于虱、蚤、蜱、螨等等节肢动物节肢动物中，通过叮咬感染人和动物中，通过叮咬感染人和动物。立克次体主要寄生于节肢动物的立克次体主要寄生于节肢动物的肠壁上皮细胞肠壁上皮细胞中或进入它们的中或进入它们的唾液腺或生殖道唾液腺或生殖道内。人畜主要内。人畜主要经这些动物的叮咬而感染。经这些动物的叮咬而感染。侵入皮肤的立克次体先在局部淋巴组织或小血侵入皮肤的立克次

15、体先在局部淋巴组织或小血管内皮细胞中生长繁殖，引起内皮细胞肿胀、管内皮细胞中生长繁殖，引起内皮细胞肿胀、增生、坏死；微循环发生障碍以及形成血栓；增生、坏死；微循环发生障碍以及形成血栓；红细胞渗出血管周围组织，引起特征性皮疹。红细胞渗出血管周围组织，引起特征性皮疹。若菌体经血流在全身各器官的小血管内皮细胞若菌体经血流在全身各器官的小血管内皮细胞中大量增殖后再释入血流会引起第二次菌血症，中大量增殖后再释入血流会引起第二次菌血症，使各血管形成血栓、坏死等。使各血管形成血栓、坏死等。人虱人虱 人人 人人人虱人虱流行性斑疹伤寒传播方式流行性斑疹伤寒传播方式 柯克斯体（柯克斯体（Coxiella）此属仅有

16、成员贝氏柯克斯体，惯称此属仅有成员贝氏柯克斯体，惯称Q热立克热立克次体，引致次体，引致Q热。专性寄生，耐热、嗜酸，热。专性寄生，耐热、嗜酸，具有滤过性，具有滤过性，通过气溶胶即可传染人类。通过气溶胶即可传染人类。形态：形态：多为短杆状，常成队排列，无鞭毛，多为短杆状，常成队排列，无鞭毛，无荚膜，可形成芽孢。无荚膜，可形成芽孢。培养特性：培养特性：不能在人工培养基上生长，通常不能在人工培养基上生长，通常用鸡胚或细胞培养。鸡胚为卵黄囊接种。用鸡胚或细胞培养。鸡胚为卵黄囊接种。抗原相的变异：抗原相的变异：一种宿主依赖性的变异现象，一种宿主依赖性的变异现象，实质是菌体脂多糖（实质是菌体脂多糖（LPS）的抗原性变异。）的抗原性变异。I相相菌株具高度感染性，表面复杂碳水化合物阻断了菌株具高度感染性，表面复杂碳水化合物阻断了抗体与菌株表面蛋白的结合。抗体与菌株表面蛋白的结合。I相菌株经鸡胚或细胞培养可变为相菌株经鸡胚或细胞培养可变为II相菌株，其表相菌株，其表面蛋白暴露可被抗体结合，毒力减弱。面蛋白暴露可被抗体结合，毒力减弱。致病性：致病性：人畜共患，主要引起人类人畜共患，主要引起人类Q热热，表现为