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1、药理学实验药理学实验 实验一实验一 药理实验基础知识药理实验基础知识实验二实验二不同给药途径对药物效应的影响不同给药途径对药物效应的影响实验三实验三 药物的协同作用和拮抗作用药物的协同作用和拮抗作用实验四实验四 硝酸士的宁硝酸士的宁LDLD5050的测定的测定实验五实验五 利尿药对家兔尿量的影响利尿药对家兔尿量的影响实验一实验一 药理实验基础知识药理实验基础知识一、目的一、目的1.1.掌握基本操作,锻炼动手、动脑能力;掌握基本操作,锻炼动手、动脑能力;2.2.更好地掌握药理学基本理论知识;更好地掌握药理学基本理论知识;3.3.培养科学思维培养科学思维二、二、基本要求基本要求1.1.实验前:实验
2、前:预习实验内容并复习相关理论知识;预习实验内容并复习相关理论知识;2.2.实验时实验时 实验器材要妥善保管;实验器材要妥善保管;实验操作按步骤进行,仔细观察实验中出现的现象,实实验操作按步骤进行,仔细观察实验中出现的现象,实事求是地做好记录;事求是地做好记录;注意节约实验药品;注意节约实验药品;维持良好的课堂纪律。维持良好的课堂纪律。3.3.实验后实验后 各组同学将实验动物处死,实验台擦干净,将实验方盘各组同学将实验动物处死,实验台擦干净,将实验方盘送回准备室;送回准备室;值日生搞好实验室卫生,将死亡动物送至指定场所;值日生搞好实验室卫生,将死亡动物送至指定场所;书写实验报告。书写实验报告。
3、三、实验报告的书写三、实验报告的书写1.1.题目题目2.2.目的目的3.3.原理原理4.4.材料材料:实验动物,器材,药品:实验动物,器材,药品5.5.方法方法:用自己的语言简单扼要描述出来;:用自己的语言简单扼要描述出来;6.6.结果结果:要求真实、清楚;:要求真实、清楚;7.7.讨论讨论:将实验结果进行比较、分析;实验:将实验结果进行比较、分析;实验中有哪些不足之处;结果异常或失败的原因;中有哪些不足之处;结果异常或失败的原因;8.8.结论结论:将实验结果进行归纳总结,应带有:将实验结果进行归纳总结,应带有提示性质。提示性质。四、实验设计基本原则四、实验设计基本原则1.1.随机原则随机原则
4、使每一实验对象都有同等的机会抽到实验组或对使每一实验对象都有同等的机会抽到实验组或对照组中,除处理因素外其他因素尽可能均衡一致,照组中,除处理因素外其他因素尽可能均衡一致,从而抵消非实验因素的影响。从而抵消非实验因素的影响。2.2.对照原则对照原则 组间对照组间对照:阴性对照,阳性对照,同因素不:阴性对照,阳性对照,同因素不同水平对照;同水平对照;自身前后对照自身前后对照3.3.重复原则重复原则五、实验动物五、实验动物1.1.动物的选择动物的选择 小白鼠:小白鼠:适用于需大量动物的实验,如某些药适用于需大量动物的实验,如某些药物的筛选,半数致死量的测定。也较适用于避孕药实物的筛选,半数致死量的
5、测定。也较适用于避孕药实验、抗炎镇痛药实验、中枢神经系统药实验、抗肿瘤验、抗炎镇痛药实验、中枢神经系统药实验、抗肿瘤药及抗衰老药实验等。药及抗衰老药实验等。大白鼠:大白鼠:比较适用于抗炎药物实验,血压测定比较适用于抗炎药物实验,血压测定、利胆、利尿药实验,也可用于进行亚急性和慢性毒、利胆、利尿药实验,也可用于进行亚急性和慢性毒性实验。性实验。豚鼠:豚鼠:因其对组胺敏感,并易于致敏,故常被因其对组胺敏感,并易于致敏,故常被选用于抗过敏药、平喘药和抗组胺药的实验。也常用选用于抗过敏药、平喘药和抗组胺药的实验。也常用于离体心脏、心房、肠管实验。又因它对结核敏感,于离体心脏、心房、肠管实验。又因它对结
6、核敏感,常用于抗结核病药的实验。常用于抗结核病药的实验。家兔:家兔:常用于观察研究脑电生理作用,药物对常用于观察研究脑电生理作用,药物对小肠的作用。由于家兔体温变化敏感,也常用于体温小肠的作用。由于家兔体温变化敏感,也常用于体温实验,用于热原检查。实验,用于热原检查。狗:狗:狗是记录血压,呼吸最常用的大动物。还狗是记录血压,呼吸最常用的大动物。还可利用狗做成胃瘘、肠瘘,以观察药物对胃肠蠕动和可利用狗做成胃瘘、肠瘘,以观察药物对胃肠蠕动和分泌的影响。在进行慢性毒性实验时,也常采用狗。分泌的影响。在进行慢性毒性实验时,也常采用狗。2.2.实验动物的编号实验动物的编号狗、兔等较大的动物可用特制的铝质
7、号码牌狗、兔等较大的动物可用特制的铝质号码牌固定在颈部或耳上。大鼠、小鼠如为白色可固定在颈部或耳上。大鼠、小鼠如为白色可用黄色苦味酸在不同的体表标志上标记。用黄色苦味酸在不同的体表标志上标记。3.3.麻醉药的选择麻醉药的选择局部麻醉:局部麻醉:常采用常采用2 2普鲁卡因做皮下浸润注射,普鲁卡因做皮下浸润注射,可用于局部手术。可用于局部手术。全身麻醉全身麻醉:吸入麻醉吸入麻醉:可将乙醚蘸在棉球上放入玻璃罩内,:可将乙醚蘸在棉球上放入玻璃罩内,利用乙醚挥发的性质,经肺泡吸收,作用较快,适用利用乙醚挥发的性质,经肺泡吸收,作用较快,适用于小鼠、大鼠短时间麻醉。于小鼠、大鼠短时间麻醉。注射麻醉:注射麻
8、醉:常用戌巴比妥钠和乌拉坦。常用戌巴比妥钠和乌拉坦。4.4.动物捉拿及固定方法动物捉拿及固定方法 小白鼠小白鼠右手抓住其尾部放在鼠笼盖铁纱网上,用左手拇指右手抓住其尾部放在鼠笼盖铁纱网上,用左手拇指及食指沿其背部向前抓起颈背部皮肤,并以左手的小及食指沿其背部向前抓起颈背部皮肤,并以左手的小指、无名指固定其尾部,便可将小鼠固定在手上。指、无名指固定其尾部,便可将小鼠固定在手上。大白鼠大白鼠用右手提起尾部,放在粗糙面上,左手的拇指和食用右手提起尾部,放在粗糙面上,左手的拇指和食指捉其头部,其余三指夹住背腹部即可固定。指捉其头部,其余三指夹住背腹部即可固定。豚鼠豚鼠豚鼠性情温和不咬人,用手握住躯干即
9、可。豚鼠性情温和不咬人,用手握住躯干即可。家兔家兔可用一手抓住家兔颈背部皮肤,将兔提起,另一手可用一手抓住家兔颈背部皮肤,将兔提起,另一手托其臀部,使兔呈坐位姿势。在进行仰位手术操作托其臀部,使兔呈坐位姿势。在进行仰位手术操作时,可用绳带将其四肢仰位捆绑在兔手术台上。头时,可用绳带将其四肢仰位捆绑在兔手术台上。头部用兔头固定夹固定。部用兔头固定夹固定。5.5.动物的给药方法动物的给药方法 小白鼠小白鼠 灌胃法灌胃法(i.g.)(i.g.):以左手固定小鼠后,使其腹部:以左手固定小鼠后,使其腹部朝上,颈部伸直。右手持配有灌胃针头的注射器,自朝上,颈部伸直。右手持配有灌胃针头的注射器,自口角插入口
10、腔,再从舌面沿上腭进入食道。小鼠灌胃口角插入口腔,再从舌面沿上腭进入食道。小鼠灌胃容量一般为容量一般为0.1-0.3m10.1-0.3m110g10g。腹腔注射腹腔注射(i.p.)(i.p.):以左手固定小鼠,方法同灌:以左手固定小鼠,方法同灌胃,右手持注射器,取胃,右手持注射器,取3030度角将针头从下腹部向头端度角将针头从下腹部向头端刺入腹腔。进针部位不宜过高,刺入不宜太深,以免刺入腹腔。进针部位不宜过高,刺入不宜太深,以免伤及内脏。小鼠腹腔注射量一般为伤及内脏。小鼠腹腔注射量一般为0.1-0.3ml0.1-0.3mll0gl0g。皮下注射皮下注射(s.c.)(s.c.):用左手固定小鼠后
11、,右手持注用左手固定小鼠后,右手持注射器于拇指和食指捏起的皮肤处进针即可。射器于拇指和食指捏起的皮肤处进针即可。静脉注射静脉注射(i.v.)(i.v.):将小鼠置于特制的固定筒内或:将小鼠置于特制的固定筒内或倒置的大漏斗下,让其尾部露出。用酒精或二甲苯倒置的大漏斗下,让其尾部露出。用酒精或二甲苯涂擦尾部,或将鼠尾在涂擦尾部,或将鼠尾在50C50C热水中浸泡半分钟使血热水中浸泡半分钟使血管扩张。左手拉尾端,右手持注射器将针头刺入尾管扩张。左手拉尾端,右手持注射器将针头刺入尾静脉,推入药液。静脉,推入药液。家兔家兔 灌胃:灌胃:需两人合作进行。一人取坐位用两腿夹需两人合作进行。一人取坐位用两腿夹持
12、兔身,左手握家兔双耳,右手抓住两前肢。另一人持兔身,左手握家兔双耳,右手抓住两前肢。另一人将木制开口器横插家兔口内,压住舌头并固定之。取将木制开口器横插家兔口内,压住舌头并固定之。取8 8号导尿管从开口器中部小孔插入食道。插管时如误号导尿管从开口器中部小孔插入食道。插管时如误入气管会出现动物的挣扎和呼吸困难。也可将导尿管入气管会出现动物的挣扎和呼吸困难。也可将导尿管的外端浸入水中,如有气泡吹出,表示插在气管内,的外端浸入水中,如有气泡吹出,表示插在气管内,此时应拔管重插。当判明导尿管在食道以内后,用注此时应拔管重插。当判明导尿管在食道以内后,用注射器接通导尿管将药液推入。射器接通导尿管将药液推
13、入。皮下、腹腔注射皮下、腹腔注射:给药方法基本上同小鼠,唯针:给药方法基本上同小鼠,唯针头可稍大,给药量可稍多。皮下与肌内为头可稍大,给药量可稍多。皮下与肌内为0.5-1.0/mg0.5-1.0/mg,腹腔为腹腔为1.0-5.0ml/mg1.0-5.0ml/mg。静脉注射静脉注射:将家兔置固定箱内,拨去耳壳外缘的:将家兔置固定箱内,拨去耳壳外缘的毛,选择一条比较明显的耳缘静脉,用酒精棉球涂擦毛,选择一条比较明显的耳缘静脉,用酒精棉球涂擦皮肤,使血管显露。用左手拇指和中指捏住兔的耳尖皮肤,使血管显露。用左手拇指和中指捏住兔的耳尖部,食指垫在兔耳注射处的下面,右手持注射器,将部,食指垫在兔耳注射处
14、的下面,右手持注射器,将针头从近耳尖处刺入,当确认针头在血管中后,将药针头从近耳尖处刺入,当确认针头在血管中后,将药液推入。液推入。6.6.动物的处死:动物的处死:大、小鼠通常用颈椎脱臼法大、小鼠通常用颈椎脱臼法处死。处死。实验二实验二不同给药途径对药物效应的影响不同给药途径对药物效应的影响 一、实验目的一、实验目的 观察不同给药途径对药物效应观察不同给药途径对药物效应的影响。的影响。二、实验材料二、实验材料 lmllml注射器、针头、小鼠灌胃针注射器、针头、小鼠灌胃针头、烧杯、普通天平、头、烧杯、普通天平、3.53.5硫酸镁溶液硫酸镁溶液三、观察指标三、观察指标 动物活动增加情况、呼吸急促、
15、动物活动增加情况、呼吸急促、反射亢进、震颤、惊厥及死亡时间、炭末推进反射亢进、震颤、惊厥及死亡时间、炭末推进率等。率等。四、实验方法四、实验方法 取禁食取禁食12h12h的昆明种小鼠的昆明种小鼠3 3只,只,称重,分别标为对照组、灌胃组和腹腔注射组称重,分别标为对照组、灌胃组和腹腔注射组按以下给药:按以下给药:A A:对照组:对照组:灌胃给生理盐水灌胃给生理盐水0.2ml/10g0.2ml/10g;B B:灌胃组:灌胃组:灌胃给灌胃给3.53.5硫酸镁溶液硫酸镁溶液0.2ml/10g0.2ml/10g;C C:腹腔注射组:腹腔注射组:腹腔注射给腹腔注射给3.53.5硫酸镁溶液硫酸镁溶液 0.2
16、ml/10g0.2ml/10g。给药后给药后注意观察动物的活动情况,是否有肌肉注意观察动物的活动情况,是否有肌肉松弛的表现。松弛的表现。15min15min后后每只小鼠均灌胃给予每只小鼠均灌胃给予5%5%炭末阿拉伯胶混悬液炭末阿拉伯胶混悬液0.2ml0.2ml。炭末灌胃后炭末灌胃后15min15min,将小鼠脱臼将小鼠脱臼处死处死,剖开剖开腹腔,腹腔,取出取出胃肠道。胃肠道。剪剪去去附着在肠管上的肠系膜附着在肠管上的肠系膜,将肠管不加牵引地将肠管不加牵引地轻轻地轻轻地平铺平铺在玻璃板上在玻璃板上(玻璃板上滴少许盐水玻璃板上滴少许盐水)。以幽门为起点以幽门为起点,测量测量炭末在肠管内的移动距离炭末在肠管内的移动距离和小肠和小肠(自幽门至回盲部自幽门至回盲部)的全长的全长,计算计算每只小每只小鼠炭末的移动距离占小肠全长百分率,鼠炭末的移动距离占小肠全长百分率,比较比较3 3组动物的组动物的活动状况活动状况和胃肠炭末和胃肠炭末推进率推进率有何不同。有何不同。五、实验结果 实验结果填入下表中 不同途径对药物效应的影响鼠号鼠号 体重体重(g)(g)药物及剂量药物及剂量 给药途径给药途径 动物反应