血清总蛋白测定标准操作规程.docx

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1、血清总蛋白测定标准操作规程1.实验原理：（双缩服法）本试剂采用双缩胭反应，即在碱性溶液中，蛋白质分子中的肽键与两价铜离子反应生成蓝紫色络合物，其中每个铜离子与五至六个肽键络合。双缩胭反应被广泛应用于临床检验，具有简便、快速可靠的特点。在试剂中加入碘化物有助于防止碱性铜络合物的自动还原，反应形成的蓝紫色物质与样本中总蛋白浓度成正比，通过测定520-56Onm处吸光度值的变化，即可计算出样本中总蛋白的浓度。Cu+蛋白质3Cu蛋白质复合物2.试剂主要组成成分组成成分浓度R硫酸铜12mmolL酒石酸钾钠64mmolL碘化钾6mmolL氢氧化钠200mmolLSTD牛人血白蛋白70gL3.样本要求:新鲜

2、无溶血血清，勿使用肝素抗凝血浆。2225保存8小时,28C保48小时，-20保存7天，样本不可反复冻融！4.检验方法：仪器法（详见DF-603/DI-600标准操作规程）5.参考范围：样本参考范围（gl）血清成年人走动后64-83成年人静卧时60-786.检验结果的解释6.1 线性范围：在给定的样本/试剂比例和条件下测定时，本试剂线性范围可达100gLo样本含量超出线性范围时，建议用0.9%（W/V）的氯化钠溶液稀释样本。最大稀释5倍。6. 2单位换算:gdL=gLO.17检验结果的局限性6.1 结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。7. 2若试剂浑浊或以水空白在540nm处吸光

3、度大于0.200时不能使用。8.产品性能指标8.1 试剂外观：蓝色透明液体，无悬浮物及沉淀物。8. 2装量：不低于标识值8. 3空白吸光度：在54Onm处，光径ICm时，空白吸光度AWO.200。8 .4分析灵敏度：在540nm处，光径ICm时，测量70gL的总蛋白，吸光度差4A20.1509 .5线性区间：试剂的线性区间为30.0T00.0gL,在此线性区间内：a）线性相关系数r应不小于0.995；b）线性相对偏差不超过6.0机8. 6精密度8.6. 1重复性：重复测试（70.010.0）g/L的样本,所得结果的变异系数（CV）应W2.0%8. 6.2批间差：重复测试（70.010.0）g/

4、L的样本，所得结果批间相对极差（R）应W5.0%8. 7准确性：相对偏差应不大于5.0机8.8稳定性：（2-8）C下，原包装存放的试剂有效期为18个月.取到期后一个月的试剂进行测试，应满足-6.1、7的要求。8. 9校准品8.1 1外观：无色透明液体。8.9.2净含量：不少于标识值8.9.3准确度：标准生化分析仪和试剂后，测定校准品，相对偏差应不大于10%o8.9.4均一性：瓶间均一性：CV5%8.9.5稳定性：（2-8）下，原包装存放的试剂有效期为12个月.取到期后1个月的试剂进行测试，应满足8.9.1-8.9.4的要求。9.临床意义：血浆蛋白主要在肝脏、浆细胞、淋巴结、牌脏和骨髓中合成。在疾病过程中，总蛋白浓度和各蛋白组分的百分率均能显著偏离正常值。由失血、炎性腹泻、肾病综合征、中度烧伤、盐滞留综合症和加西卡病（急性蛋白缺乏）均能引起低蛋白血症。在严重脱水和疾病如多发性骨髓瘤会发生高蛋白血症。由于一种血浆蛋白组分百分率的改变能引起血浆蛋白相对百分率的改变。此类病例中总蛋白的量常无变化。A/G比例常被用作白蛋白和球蛋白组分分配的指标。在肝硬化、肾小球性肾炎、肾病综合征、急性肝炎、红斑狼疮以及确诊的急性和慢性炎症时常出现A/G比例改变。总蛋白测定被用作多种疾病，如肝脏、肾脏、骨髓瘤以及其他代谢性或营养失调等疾病的诊断或疗效监测。