γ-谷氨酰基转移酶测定标准操作规程.docx

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1、Y-谷氨酰基转移酶测定标准操作规程1.检验原理：（L-L谷氨酰-3-羟基-对硝基苯胺底物法）以上广谷氨酰刀-羟基-4-硝基苯胺为底物,双甘氨肽为谷氨酰基的受体。在谷氨酰基转移酶（GGT）的催化下，谷氨酰转移到双氨肽上。同时释放出黄色的2-硝基-5-氨基苯甲酸,后者可使405nr410nm处吸光度增高。在底物过剩的情况下，5-氨基-2-硝基苯甲酸的生成速率与血清中GGT浓度成正比，因而可监测5-氨基-2-硝基苯甲酸生产速率测定血清GGT活性浓度。GGT活性测定的反应式如下：1.-L谷氨酰-3-羟基-4-硝基苯胺+双廿氨肽Lr-谷氨酰-双甘氨肽+2-硝基-5-氨基苯甲酸1.-L谷氨酰-3-羟基-4

2、-硝基苯胺+Lr-谷氨酰-3-羟基-4-硝基苯胺.2-硝基-5-氨基苯甲酸+L-l谷氨酰-3-羟基-4-硝基苯胺2.试剂主要组成成分组成成分浓度Rl3羟甲基氨基甲烷缓冲液（pH8.0）1OOmmo1/L双甘肽1OOmmo1/LR2Ll谷氨酰-3-羟基-4-硝基苯胺6mmolL3.样本要求：新鲜无溶血血清。在2225C保存8小时，28C保48小时，-20保存7天，样本不可反复冻融！样本中抗坏血酸含量W0.3g/L、胆红素含量W0.4gL血红蛋白含量W5.0g/L、乳糜含量W5.0gL对检测结果基本无影响。4.检验方法；仪器法（详见DF-603DI-600标准操作规程）5.参考范围：样本参考范围（

3、U/L）血清男性11-50女性7-326.检验结果的解释：6. 1样本含量超出线性范围时，建议用0.9%（WV）的氯化钠溶液稀释样本。建议最大稀释不超过10倍7. 2.单位换算:ukatL=UL16.67IO-37.检验方法的局限性7.1 结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。7. 2若试剂浑浊，或以水空白在405nm处吸光度大于0.800时不能使用。8. 3检验结果仅供参考，不作为临床诊断唯一依据。8.试剂性能指标8.1 试剂外观：R1：无色透明液体，无悬浮物及沉淀。R2：无色或淡黄色透明液体，无悬浮物及沉淀。8. 2装量：不低于标识值。8. 3试剂空白8.3. 1试剂空白吸光

4、度：在37、405nm处，光径ICm时，空白吸光度AW0.808. 3.2试剂空白吸光度变化率：在37、405nm处，光径ICnl时，用生理盐水作为样品加入试剂测试时，ZAminWO.005.8 .4分析灵敏度：在405nm处，光径ICnI时，测量50U/L的L谷氨酰基转移酶时，吸光度变化4Amin20.019 .5线性区间：试剂的线性区间为10-450UL,在此线性区间内：a)线性相关系数r应不小于0.9900；b)10-50U/L区间内，线性绝对偏差不超过5UL;(50-450)U/L区间内,线性相对偏差不超过10%。8. 6精密度8.6. 1重复性：CV5%8. 6.2批间差:R10%9. 7准确度：相对偏差应不大于15机10. 床意义：丫-谷氨酰转肽酶(GGT)用于肝胆疾病的诊断和疗效监测，患有此类疾病时GGT的活性通常会升高，并是己知的最敏感的指标之一。GGT亦是隐性酒精中毒的筛查试验。长期服用苯巴比妥和苯妥英的患者血清中GGT的活性升高。