大鼠抗精子抗体elisa试剂盒技术参数.docx
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1、大鼠抗精子抗体elisa试剂盒技术参数使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中抗精子抗体(ASA力含量。实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中大鼠抗精子抗体(AsAb)水平。用纯化的大鼠抗精子抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被单抗的微孔中依次加入抗精子抗体,再与HRP标记的抗精子抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的抗精子抗体(ASAm呈正相关。用酶标仪在45。八侬波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠抗精子抗体(AAb)浓度。标本要
2、求1 .标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-2。C保存,但应避免反复冻融2 .不能检测含NaN3的样品,因NN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤工标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。:LooPgm(S号标准品15*1的原倍标准品加入15,O标准品稀群液5Opgml4号标准品工5。山的S号标准品加入15。川标准品稀释液25pgMrSO,l的4号标准品加入156l标准品稀释液12.5pgkv2号标准品ISoH的3号标准品加入SOp.I标准品稀释液6.25pgFv1号标准品工5。川
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