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1、合成的抗氧化剂和抗菌剂因普遍存在的毒理效应以及不断增强的细菌耐药 性,引发了消费者对其安全性和实用性越来越多的质疑和排斥。而植物挥发油因 安全无毒,具有抗氧化、抗菌、抗炎、抗肿瘤等生物活性,且感官体验良好,被 认为是合成添加剂极具潜力的天然替代品,其在食品加工、医药和化妆品等领域 均具有极为广阔的开发应用前景。通过超临界C02萃取法分别萃取4种不同干燥处理条件下的红花玉兰花蕾 的挥发油,并通过气相色谱-质谱联用(GC-MS)结合保留指数(Rl)对挥发油 进行了定性和定量分析,同时利用1,1-二苯基-2-三硝基苯脏(DPPH)自由基清 除法、22-联氮-双-3-乙基苯并噫理咻6磺酸(ABTS)阳
2、离子自由基清除法和 还原能力法评价其抗氧化活性,并利用滤纸片扩散法评价体外抗菌活性。考察红 花玉兰花蕾在不同干燥处理下,挥发油萃取率、化学组成及抗氧化、抗菌活性的 差异,以期为红花玉兰挥发油提取工艺的确定提供技术支持和生产实践指导,同 时也为红花玉兰挥发油的开发和应用提供理论依据。1、不同干燥方式对挥发油萃取率的影响在不同干燥处理条件下,红花玉兰花蕾的挥发油萃取率有极显著差异。其中, 冷冻干燥花蕾的挥发油萃取率最高,达(2.7360.138) %,晒干和55 C烘干次 之,分别为(1.8640.025) %、(1.6800.007) %,且这两种干燥处理间差异 没有极显著差异,而阴干花蕾的挥发
3、油萃取率最低,仅为(1.2170.014) %o 结果表明冷冻干燥处理能最大限度地保留红花玉兰花蕾的挥发油含量,而阴干处 理造成的挥发油损失最为显著。2、不同干燥方式对挥发油成分及含量的影响冷冻干燥花蕾的挥发油色谱峰主要集中在630 min,阴干、晒干和55 C烘 干花蕾挥发油总离子流图相似,色谱峰主要集中在14-30 mino红花玉兰花蕾 4种干燥处理所得的挥发油共鉴定出49种化合物,其中11种化合物为共有成分, 包括8种煌类化合物及4H-xanthalongia、VE和y-谷留醇。在冷冻干燥花蕾的挥 发油中,共鉴定出26种化合物,占检测到的挥发油总量的77.71%,其中特有成 分11种,占
4、检测到挥发油总量的7.42%,以菇烯(5.62%)和菇醇类(1.2%)为 主;两种主要成分Y-谷下醇(27.84%)和4H-xanthalongia (27.09%)相对含量 远高于其他成分,烧类(8.74%)相对含量也较高,且VE(4.71%)和菇烯类(5.62%) 相对含量较酯类(2.03%)更高,并含有少量酚类(0.48%)、醇类(1.20%)。从 晒干、55 C烘干和阴干处理的花蕾挥发油中分别鉴定出20、20、30种化合物, 分别占各自检测到挥发油总量的84.8%、71.1%和70.65%,并且晒干、55 烘干 和阴干处理花蕾挥发油中-谷留醇(32.56%、28.01% 24.39%)
5、和燃类(37.42%、 27.82%、29.73%)相对含量均远高于其他成分。此外,晒干和55 烘干花蕾中 酮类相对含量(分别为10.36%、8.54%)相对较高,但菇烯类相对含量(分别为 0.11% 0.16%)较低,仅含有少量VE (分别为0.69% 0.33%)及酯类(分别 为0.76%、1.04%),且这两种处理的花蕾挥发油共有成分多达18种。同样地, 阴干花蕾挥发油中的高氧化物质相对含量也非常高,如酮类(7.82%)、醛类 (1.78%)和酯类(1.03%),而VE (0.21%)和醇类(0.14%)成分相对含量较 低,且无菇烯类成分,特有的12种成分(3.84%)也以醛类(1.78
6、%)为主。3、挥发油的抗氧化活性红花玉兰4种干燥花蕾的挥发油质量浓度与DPPH自由基清除率、ABTS阳 离子自由基清除率以及吸光度(A700nm)间建立的回归方程线性拟合良好。实 验结果表明,红花玉兰花蕾挥发油具有一定的抗氧化活性,但活性相对阳性对照 抗坏血酸较弱。4种不同干燥方式处理花蕾的挥发油的抗氧化性在3种测定方式 下均呈现一致的结果,从高到低均表现为:冷冻干燥阴干晒干55 烘干, 且冷冻干燥花蕾的挥发油活性远高于其他3种干燥处理的花蕾。DPPH自由基清 除率和ABTS阳离子自由基清除率测定实验中,冷冻干燥花蕾的挥发油IC50值 分别是阴干、晒干、55 烘干花蕾挥发油的0.25、0.19
7、、0.17倍和0.36、0.29、 0.25倍,在还原能力测定实验中,冷冻干燥花蕾挥发油线性方程斜率也大于其他 3种干燥方式,说明在相同质量浓度下,冷冻干燥花蕾挥发油抗氧化活性更强。4、挥发油的抗菌活性红花玉兰花蕾挥发油对4种供试菌均有一定的抑制作用,但其抑菌活性要弱 于氨节青霉素。4种干燥处理花蕾的挥发油均对金黄色葡萄球菌的抑制作用最 强,且冷冻干燥花蕾挥发油抑菌活性显著高于其他干燥处理,阴干花蕾挥发油对 金黄色葡萄球菌抑制作用最弱。此外,冷冻干燥和阴干花蕾挥发油对枯草芽泡杆 菌的抑制作用差异不显著,但两者均显著高于晒干和55 烘干处理。4种干燥 花蕾挥发油对大肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌的抑制作
8、用则均无显著性差异。冷冻干 燥和阴干花蕾挥发油对4种供试菌的抑制作用由高到低依次为:金黄色葡萄球菌 (G+) 枯草芽抱杆菌(G+) 大肠杆菌(G) 鼠伤寒沙门氏菌(G-), 晒干和烘干花蕾的挥发油的抑菌作用由高到低则依次为:金黄色葡萄球菌(G+) 大肠杆菌(G) 鼠伤寒沙门氏菌(G) 枯草芽抱杆菌(G+)。结论3冻干燥是红花玉兰花蕾最佳的干燥方式,该研究对红花玉兰挥发油提取工 艺的制定和产品的开发应用提供了重要的参考。不同干燥方法对红花中羟基红花黄色素A的影响测定不同干燥方法对红花药材中羟基红花黄色素A的影响,根据含量的动 态变化确定红花药材的最佳干燥方法。本品为菊科植物红花CarthamUS
9、tinetoriUSL.的干燥花。夏季花由黄变红时采 摘,阴干或晒干。其性辛,温。归心、肝经。主要用于活血通经,散瘀止痛。用 于经闭,痛经,恶露不行,痛痕痞块,疮伤肿痛。一、干燥方法目前,对于红花的加工方法仅见文献记载有阴干、晒干、45、60烘干, 但未综合地进行分析,本实验比较了阴干法、晒干法、烘干法、太阳房干燥,不 同干燥法处理下红花中羟基红花黄色素A的变化。1、烘干中药3产地因地制宜地采用火炕、火墙或直接燃烧农作物秸秆、树枝、薪柴 等提供热量,加速中药材内部水分的动力学过程而促使水分加快转移释放,达到 快速干燥的目的。2、阴干法这种方法是将药材放置于室内或大棚的阴凉处,利用流动的空气,吹
10、去水分 而达到干燥的目的,该法常用于含有挥发油的药材以及易走油、变色的药材。3、日晒法这是大多数药材常用的一种干燥方法,JS择晴天、有风的天气,将药材薄摊 在水泥地上,利用日光晾晒,要注意及时翻动,保证口光照射均匀。4、太阳房干燥是指将药材放入太阳能干燥房中,利用太阳房吸收太阳能使房内温度升高, 从而干燥药材的方法。二、不同干燥方法对红花羟基红花黄色素A的影响1、供试材料本试验中所用红花采自甘肃省定西市陇西县内各红花种植示范点。2、仪器主要仪器AgiIentl220高效液相色谱仪,包括四元泵、自动进样器和二极管 阵列检测器,美国安捷伦科技有限公司,色谱柱为Agilent5HCC18 (2) 1
11、50*4.6mm;SQP电子分析天平,赛多利斯科学仪器(京)有限公司;KQ32OOE型 数控超声波清洗器,市超声仪器有限公司;DHG-9035A电热鼓风干燥箱,科学仪 器有限公司;BCD-278KACB冰箱,有限公司。3、试剂乙懵(色谱纯)、磷酸(优级纯),甲醇(分析纯),其余试剂为分析纯,水 为自制超纯水对照品:羟基红花黄色素A (批号:;纯度:98.0%), HPLC级标 准品购自上海源叶生物科技有限公司。4、试验方法(1)羟基红花黄色素A的测定:按2015年中国药典第一部红花项下 羟基红花黄色素A含量测定的方法进行测定。色谱条件:采用C18柱;流动相:甲醇-乙月青0.7%磷酸溶液(26:
12、 2: 72); 检测波长:403nm;柱温:25C;流速:LomI/min。对照品溶液的制备:精密称取羟基红花黄色素A对照品0.0033g,置于25ml 容量瓶中,加25%甲醇定容,成为0.132mgml的对照品溶液,经0.45m微孔滤 膜滤过即得。供试液的制备:取红花粉末(过60目筛)约0.4g,精密称定,置具塞锥 形瓶中,精密加入25%甲醇溶液50ml,称定重量,超声处理40min,放冷再称 定重量,用25%甲醇溶液补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,再经0.45m 微孔滤膜滤过即得。样品测定:按供试品溶液的制备平行作两份,按照上述色谱条件进样,测 定羟基红花黄色素A的峰面积,以外标法计算样品含量。不同干燥方法下干燥 的红花中羟基红花黄色素A的测定结果见表K三、结论从实验过程及实验结果可以得出,阴干法耗时长,所需场地大,干燥后色泽 差;晒干法所需时间长,占用场地大,受气候条件制约,成品色泽发暗;太阳房干 燥操作简单、整体烘烤均匀、干燥后的产品色泽好;烘干法温度可控制、烘烤均 匀、不受自然条件影响,但是整体耗能高。从实验结果来看45烘干、和太阳 房干燥红花的有效成分含量明显高于晒干和60C烘干的羟基红花黄色素A的含 量。