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1、一、目的意义一、目的意义二、文献综述二、文献综述三、研究内容三、研究内容四、研究方法路线四、研究方法路线一、目的意义一、目的意义榛子是一种重要的经济树种,通过组培对榛子优榛子是一种重要的经济树种,通过组培对榛子优良品种的快速繁殖具有很大意义。良品种的快速繁殖具有很大意义。本研究针对内生菌污染严重的问题,筛选合适本研究针对内生菌污染严重的问题,筛选合适的外植体灭菌方法,同时,建立一个榛子快繁的无的外植体灭菌方法,同时,建立一个榛子快繁的无菌培养体系,为第一步芽诱导和芽增殖阶段的培养菌培养体系,为第一步芽诱导和芽增殖阶段的培养提供充足的无菌试材。提供充足的无菌试材。二、文献综述二、文献综述1、植物
2、组培研究概况、植物组培研究概况2、榛子组培研究进展3、存在的问题1 1、植物组织培养研究概况、植物组织培养研究概况2 2、榛子组培研究进展、榛子组培研究进展3 3、存在问题、存在问题1 1、植物组培研究概况及进展、植物组培研究概况及进展welcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience植物组织培养在植物组织培养在2020世纪世纪30 30 年代初发展起。年代初发展起。5050年代中期,细胞分裂素的发现使组培再生植株成为年代中期,细胞分裂素的发现使组培再生植株成为现实。现实。6060
3、年代后期,植物组织培养技术在基础理论年代后期,植物组织培养技术在基础理论和实际操作方面不断取得进展和实际操作方面不断取得进展 ,并应用到很多相,并应用到很多相关领域。关领域。9090年代后,我国植物组培产业开始发展。年代后,我国植物组培产业开始发展。2 2、榛子组培的研究进展、榛子组培的研究进展3 3月份采集的温室嫁接苗是最好的外植体材月份采集的温室嫁接苗是最好的外植体材料,外植体消毒料,外植体消毒70-95%C70-95%C2 2H H5 5OHOH和和0.5%-5.25%NaClO0.5%-5.25%NaClO。在组培的初代培养中,在组培的初代培养中,NasNas和和ReadRead通过试
4、验得通过试验得出,出, WPMWPM和和NN69NN69培养基适用于榛子组织培养。培养基适用于榛子组织培养。在增值培养中,在增值培养中,BassilBassil、NasNas和和ReedReed等对等对榛子增值各种培养条件做了相关研究。榛子增值各种培养条件做了相关研究。3 3、存在的问题、存在的问题榛子内生菌污染严重榛子内生菌污染严重, , 使得榛子的组使得榛子的组织培养很难建立一个无菌的繁殖体系。织培养很难建立一个无菌的繁殖体系。本研究就是针对此问题,通过试验从而筛本研究就是针对此问题,通过试验从而筛选合适的灭菌方法,并建立起无菌培养体系,选合适的灭菌方法,并建立起无菌培养体系,为芽丛的诱导
5、和增殖富集足够的无菌材料。为芽丛的诱导和增殖富集足够的无菌材料。三、主要研究内容三、主要研究内容1 1、外植体的表面灭菌、外植体的表面灭菌2 2、预培养、预培养3 3、芽诱导培养、芽诱导培养1 1、外植体的表面灭菌、外植体的表面灭菌野外采集大果榛子当年生枝条,室内剪取侧野外采集大果榛子当年生枝条,室内剪取侧芽,流水冲洗,剥取外层芽鳞,进行表面灭菌。芽,流水冲洗,剥取外层芽鳞,进行表面灭菌。灭菌处理拟采用灭菌剂灭菌处理拟采用灭菌剂HgClHgCl2 2、NaClONaClO、H H2 2O O2 2,或配合使用抗生素氨西林钠、制霉菌素、庆大霉或配合使用抗生素氨西林钠、制霉菌素、庆大霉素,设计不同
6、的浓度和处理时间梯度进行灭菌,素,设计不同的浓度和处理时间梯度进行灭菌,之后用无菌水充分浸洗。之后用无菌水充分浸洗。welcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience2 2、预培养、预培养将外植体接种于无激素的将外植体接种于无激素的 DKW DKW 培养培养基。培养基。培养3 3周后,根据外植体的染菌情况周后,根据外植体的染菌情况筛选适合的灭菌处理。筛选适合的灭菌处理。3 3、芽诱导培养、芽诱导培养将上一阶段筛选出的无菌外植体再剥将上一阶段筛选出的无菌外植体再剥去外层芽鳞,接种于芽
7、诱导培养基进行培去外层芽鳞,接种于芽诱导培养基进行培养,筛选适合的培养基。养,筛选适合的培养基。培养基设计拟选用培养基设计拟选用DKWDKW、WPMWPM、NG1NG1、NG2NG2、DGDG、MGMG、MSMS几种,所有培养基中均添加几种,所有培养基中均添加BA(5mg/L)BA(5mg/L),IBA(0.01mg/L)IBA(0.01mg/L),蔗糖,蔗糖30g/L30g/L,琼,琼脂脂6g/L6g/L,PHPH调为调为5.85.8,培养条件为,培养条件为(23(23士士2) 2) 的温度的温度 ,16 h ,16 h光周期、光周期、28mol/(m28mol/(m2 2s)s)光强光强。四、研究方法路线四、研究方法路线外植体外植体预培养预培养芽诱导芽诱导培养培养不同培不同培养基养基根据腋根据腋芽生长芽生长状况筛状况筛选出最选出最佳培养佳培养基基表面灭菌表面灭菌筛选出最佳筛选出最佳灭菌办法灭菌办法