生物化学分子杂交.ppt
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1、分子杂交与印迹技术分子杂交与印迹技术Molecular Hybridization & Blotting Technology核酸分子杂交核酸分子杂交 (nucleic acid hybridization ) 在在DNA复性过程中,如果把不同复性过程中,如果把不同DNA单链分子放在同一溶液中,单链分子放在同一溶液中,或把或把DNA与与RNA放在一起,只放在一起,只要在要在DNA或或RNA的单链分子之的单链分子之间有一定的间有一定的碱基配对碱基配对关系,就可关系,就可以在不同的分子之间形成以在不同的分子之间形成杂化双杂化双链链(heteroduplex) 。一、分子杂交与印迹技术的原理一、分子
2、杂交与印迹技术的原理(一)印迹技术(一)印迹技术 应用:应用:核酸靶核酸靶DNA或或RNA序列的定性与定量分析。序列的定性与定量分析。(二)探针技术(二)探针技术 探针探针 (probe) 一小段用同位素、生物素或荧光染料一小段用同位素、生物素或荧光染料标标记其末端或全链的标标记其末端或全链的已知序列已知序列的多聚核的多聚核苷酸,与固定在膜上的核苷酸结合,判断苷酸,与固定在膜上的核苷酸结合,判断是否有同源的核酸分子存在。是否有同源的核酸分子存在。 探针的种类: 基因组DNA探针 cDNA探针 RNA探针 人工合成的寡核苷酸探针53外切酶活性二、印迹技术的类别及应用二、印迹技术的类别及应用(一)
3、(一)DNA印迹技术印迹技术 (Southern blotting) 用于基因组用于基因组DNA、重组质粒和噬菌体、重组质粒和噬菌体的分析。的分析。(二)(二)RNA印迹技术印迹技术 (Northern blotting) 用于用于RNA的定性定量分析。的定性定量分析。(三)蛋白质的印迹分析(三)蛋白质的印迹分析 (Western blotting) 用于蛋白质定性定量及相互作用研究。用于蛋白质定性定量及相互作用研究。 Paper TowelsSouthern BlottissueSDSProtKPhenolChloroformethanol precipitationSpinAgarose
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- 关 键 词:
- 生物化学 分子 杂交
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