猕猴桃无病毒种苗生产技术规程.docx
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1、DBXX陕西省市地方标准DBXXTXXX-20xx狮猴桃无病毒种苗生产技术规程Technicalcodefortheproductionofvirus-freekiwifruitstock(征求意见稿)20xx-xx-xx发布20xx-xx-xx实施陕西省市场监督管理局发布前言本标准依据GB/T1.1-2020标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则起草。本标准由陕西省农业农村厅提出并归口。本标准起草单位:西北农林科技大学、杨凌梦绿生态农业有限责任公司。本规程起草人:刘占德,张阿玲,史遐,刘艳飞,贺浩浩,高志雄。本标准为首次发布。I适用范围本标准规定了狒猴桃病毒脱除方法、病毒检测方法
2、、脱毒种苗保存与繁殖。本标准适用于狒猴桃脱毒种苗繁育及擀猴桃病毒检测。2术语和定义下列术语和定义适用于本标准。2.1 茎尖培养脱毒Viruseliminationbyshoottipculture切取0.20.5mm带毒试管苗茎尖,经组织培养获得无病毒植株的过程。2.2 茎尖超低温疗法脱毒Viruseliminationbyshoottipcryotherapy切取1.02.0mm带毒试管苗茎尖,经液氮处理后进行组织培养获得无病毒植株的过程。2.3 热疗法结合茎尖培养脱毒Viruseliminationbythermotherapycombinedwithshoottipculture先对带毒
3、试管苗进行热处理,热处理结束后取茎尖进行茎尖培养获得无病毒植株的过程。2.4 化疗法结合茎尖培养脱毒Viruseliminationbychemotherapycombinedwithshoottipculture先将带毒试管苗置于含抗病毒药物的培养基中培养,培养结束后取茎尖进行茎尖培养获得无病毒植株的过程。2.5 热疗法结合茎尖超低温疗法脱毒Viruseliminationbythermotherapycombinedwithshoottipcryotherapy先对带毒试管苗进行热处理,热处理结束后取茎尖进行超低温处理,最后经组织培养获得无病毒植株的过程。2.6 化疗法结合茎尖超低温疗法脱
4、毒Viruseliminationbychemotherapycombinedwithshoottipcryotherapy先将带毒试管苗置于含抗病毒药物的培养基中培养,培养结束后取茎尖进行超低温处理,最后经组织培养获得无病毒植株的过程。2.7 化疗法结合热疗法和茎尖培养脱毒ViruseliminationbychemotherapycombinedwithIhermotherapyandshoottipculture先将带毒试管苗置于含抗病毒药物的培养基中培养,之后进行热处理,热处理结束后取茎尖进行组织培养获得无病毒植株的过程。2.8 热疗法结合化疗法和茎尖超低温疗法脱毒Viruselimi
5、nationbythermotherapycombinedwithchemotherapyandshoottipcryotherapy先将带毒试管苗置于含抗病毒药物的培养基中培养,之后进行热处理,热处理结束后再取茎尖进行超低温处理,最后经组织培养获得无病毒植株的过程。2.9 无病毒母株virus-freemotherplant通过病毒脱除处理或宜接筛选获得的、经检测并确认不携带本文件规定的病毒的植株。2.10无病毒苗木virus-freeseedling未携带有本文件规定的病毒的称猴桃苗木。2.11 无病毒母本园virus-freemotherblock用于提供狒猴桃无病毒母株保存的阚地。3脱
6、毒原理病毒在植物体内分布不均匀,植物茎尖顶端分生组织中的病毒含量较低甚至不含病毒,热处理及抗病毒药物处理能够抑制病毒RNA的合成,因此可通过茎尖培养,或结合热疗及化疗对植物病毒进行脱除;在茎尖超低温疗法脱除植物病海中,茎尖经过冷冻保护处理后转入液氮中冷冻时,分化程度较低、核质比大、自由水含量较低的茎尖顶端分生组织和幼嫩叶原基细胞更容易存活。由于很多病毒无法侵入茎尖顶端分生组织,因此无病毒的顶端分生组织可以在液氮冷冻后存活并再生为无病毒植株。4病毒检测与脱除4.1 病毒种类病毒种类见表A.1包括狒猴桃病毒A(ActinidiavirusA,AcVA)物;猴桃病毒B(ActinidiavirusB
7、,AcVB)、狮猴桃种传潜隐病毒(Actinidiaseedbornelatentvirus,ASb1.V)狮猴桃黄化环斑病毒CActinidiayellowingringspotvirus,AYRSpV)A猴桃病毒1(Actinidiavirus1,AcV-I)、擀猴桃黄化病毒1(Actinidiayellowingvirus1,AcYVl)、物猴桃黄化病毒2(AClinidiayellowingvirus2,AcYV2)、苹果茎沟病毒(Applestemgroovingvirus,ASGV)、樱桃卷叶病毒(Cherry1.eafRollvirus*C1.RV)、天竺葵带斑病毒(Pelarg
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